اسپری فیکساتور مدل BIO FIX  برای فیکس کردن لام های سیتولوژی مورد استفاده قرار می گیرد که با نفوذ سریع در بافت باعث حفظ ساختار فیزیکی بافت و جلوگیری از اتولیز بافت می گردد. این محصول ساختار بافت را تغییر نداده و در فرایند رنگ آمیزی بافت نیز خللی وارد نمی کند.

• برای فیکس لام های سیتولوژی (نمونه های پاپ اسمیر)
• قدرت نفوذ سریع در بافت
• حفظ ساختار فیزیکی بافت
• جلوگیری از اتولیز بافت
• عدم تغییر در ساختار بافت
• عدم اختلال در رنگ آمیزی

اسپری فیکساتیو

سرد کردن سریع بافت و منجمد کردن بلافاصله نمونه از روش‌هائی است که در فرایند مطالعات هیستوپاتولوژیک دارای قدمت است. یکی از مطالعاتی که از سیستم انجماد یا سرد کردن سریع نمونه تهیه شده استفاده می‌کند تست مشهور به پاپ اسمیر است. در ادامه این مقاله در مورد استفاده از اسپری فیکساتیو، ضرورت و مزایای آن بحث خواهیم کرد. برای آشنایی بیشتر با کاربرد اسپری فیکساتیو در تست پاپ اسمیر با ما همراه باشید.

پاپ اسمیر

ابتدا بطور خلاصه ببینیم پاپ اسمیر چیست و با چه هدفی انجام می‌شود؟ متخصصان سیتولوژی گاهی تست پاپ اسمیر را سیتولوژی دهانه رحم می‌نامند. این تست برای مطالعه سلول‌های طبیعی و تغییر‌یافته در اثر بیماری، فعالیت‌های هورمونی غیرطبیعی و سرطان دهانه رحم در سیستم ژنیتال بانوان است.

البته آزمایش پاپ اسمیر علاوه بر جستجوی سلول‌های سرطانی، سلول‌هایی را جستجو می‌کند که در آینده می‌توانند سرطانی شوند. اگر با این آزمایش بتوان سلول‌های پیش‌سرطانی را پیدا کرد، درمان می‌تواند به پیشگیری از سرطان کمک کند.

روش پاپانیکولائو یا تست پاپ اسمیر، شامل لایه‌برداری خود‌به‌خودی یا جدا کردن مکانیکی سلول‌ها(میکروبیوپسی سطحی) برای تشخیص عفونت‌های مختلف دهانه رحم در بانوان است.

تکنیک پاپ اسمیر

سیتوپاتولوژیست تنها در صورتی می‌تواند تفسیر دقیقی ارائه دهد که نمونه سلولی به‌خوبی حفظ شده باشد. طی تست پاپ اسمیر، ابزاری به نام اسپیکولوم دیواره‌های واژن را از هم جدا نگه می‌دارد. نمونه سلول‌های دهانه رحم با استفاده از یک برس نرم و یک دستگاه خراش دهنده صاف به نام اسپاتول جمع‌آوری می‌شود. سلول‌ها در یک بطری قرار می‌گیرند که حاوی محلولی برای حفظ آنها است. در تصویر شماتیک زیر شما مراحل تهیه نمونه را ازدهانه رحم می‌بینید.

تکنیک پاپ تست (الف) چند قطره از ترشحات اندوسرویکال آسپیره می‌شود. (ب) قطره‌ها روی یک لام برچسب‌دار قرار می‌گیرند و آغشته نمی‌شوند. ج) سلول‌های سطحی دهانه رحم خراشیده می‌شوند. (د) سلول‌های خراشیده شده با قطره‌های اندوسرویکال مخلوط شده و با هم آغشته می‌شوند. (E) لام بلافاصله در اتانول 95% قرار می‌گیرد یا با اسپری فیکساتیو تیمار می‌شود.

اسپری فیکساتیو پاپ اسمیر

اسپری فیکساتیو محلولی است که برای انجام تثبیت نمونه‌ها، قبل از اینکه فرصتی برای خشک شدن در هوا داشته باشند، مورد استفاده قرار می‌گیرد. تثبیت یک مرحله مهم در حفظ ساختار سلولی و مورفولوژی بافت در طول پردازش، رنگ‌آمیزی و آنالیز نمونه است. اسپری تثبیت کننده اغلب حاوی مخلوطی از الکل‌ها، استون و سایر فیکساتورها است که به سرعت در آماده‌سازی سلولی نفوذ کرده و پروتئین‌ها را دناتوره می‌کنند تا ساختار سلولی را تثبیت کنند. این امر مورفولوژی بافت را حفظ و امکان رنگ‌آمیزی بهینه را فراهم می‌کند.

انواع اسپری فیکساتیو پاپ اسمیر

اسپری فیکساتیو مورد استفاده در تست پاپ اسمیر با فرمول‌های متفاوت و به‌صورت تجاری در دسترس هستند. برخی از این اسپری‌های فیکساتیو عبارتند از:

EDM3

یکی از نمونه‌های اسپری فیکساتیو، اسپری فیکساتیو سیتولوژی غیر‌آئروسل EDM3 است که حاوی پلی‌اتیلن گلیکول محلول در آب و الکل برای تثبیت نمونه‌های پاپ اسمیر است. یک لایه سخت و نازک برای به حداکثر رساندن تثبیت سلولی و اطمینان از انجام رنگ‌آمیزی بهینه تشکیل می‌شود.

سیتوسپری

سیتوسپری – محلولی است که برای تثبیت اسمیر سیتولوژیک در یک بطری اسپری ارائه می‌شود. این محصول حاوی غلظت بهینه الکل و پلی گلیکول است. برای پر کردن مجدد بطری سیتواسپری با اتومایزر از محلول سیتوسپری بسته‌بندی شده استفاده می‌شود

Pap-Spray™

Pap-Spray™ یک فرمول پلی اتیلن گلیکول برای تثبیت سلول‌ها در سیتولوژی جهت حفظ کیفیت آنها است. Pap-Spray™ یک تثبیت کننده سریع و موثر با فرمول خاص است که برای تثبیت بهتر نمونه‌های پاپ اسمیر و ساختار سلولی، توسعه یافته است. برای تولید جزئیات بهتر هسته‌ای و سیتوپلاسمی، منعقد کننده اتانول با دیگر تثبیت کننده‌های بهینه شده، ترکیب می‌شود. فیکساتور Pap-Spray™، در روند تهیه نمونه تازه با دیواره‌های شکننده، قابلیت تثبیت سلول‌های ستونی و سنگ‌فرشی غشای سلولی متمایز همراه با الگوهای نوکلئوکروماتین را دارد.

فیکساتورهای مبتنی بر فرمالین

فیکساتورهای مبتنی بر فرمالین برای تثبیت سریع نمونه‌های سلولی، با مکانیسم اتصال متقابل پروتئین‌ها و حفظ شکل سلولی در سیتولوژی، توسعه یافته‌اند. برای اطمینان از حفظ بهترین شکل ممکن ساختار سلولی، از فیکساتورهای مبتنی بر فرمالین، استفاده می‌شود. رایج‌ترین فیکساتور مبتنی بر فرمالین در بافت‎شناسی فرمالدئید است. این فیکساتور معمولاً به‌عنوان یک فرمالین بافر خنثی 10٪ (NBF) استفاده می‌شود که تقریباً 3.7٪ – 4.0٪ فرمالدئید در بافر فسفات، با pH. 7 است

کاربرد اسپری فیکساتور

پس از تهیه نمونه پاپ اسمیر از بیمار، لازم است بلافاصله عمل تثبیت انجام شود تا از آلودگی سلولی نمونه جلوگیری شود. هنگام آغشته شدن، لام باید بلافاصله در اتیل الکل 95% قرار داده شود یا قبل از اینکه فرصتی برای خشک شدن در هوا داشته باشد، برای پوشاندن تمام سطح با یک پوشش ضخیم با مقدار کافی اسپری فیکساتیو، اسپری شود. استفاده سریع اسپری برای جلوگیری از خشک شدن و اعوجاج سلول‌ها بسیار مهم است. اسپری تثبیت کننده باید از فاصله یکسان و بطور یکنواخت روی نمونه اسپری شود.

پس از تثبیت، نمونه را می‌توان پردازش، رنگ‌آمیزی و زیر میکروسکوپ بررسی کرد. اگر نمونه دیرتر از زمان توصیه شده تثبیت شود، در روند رنگ‌آمیزی، ساختارهای دانه‌ای مایل به قهوه‌ای تشکیل می‌شود و در تشخیص صحیح، اختلال ایجاد می‌کند.

با اسپری کردن مقدار کافی از اسپری فیکساتیو، یک لایه نازک محافظ از آب و پلی‌اتیلن محلول در الکل گلیکول روی سلول‌های نمونه تشکیل می‌شود و تثبیت سلولی را به حداکثر می‌رساند و ارائه یک محیط رنگ‌آمیزی بهینه را که برای بررسی میکروسکوپی پاپ اسمیر لازم است، تضمین می‌کند.

استفاده از محلول‌های تثبیت کننده در سیتوپاتولوژی و هیستوپاتولوژی قدمت زیادی دارد. این محلول‌های تخصصی برای تثبیت وضعیت سلول‌ها و بافت‌ها و افزایش دقت در رنگ‌آمیزی سلول‌ها و بافت‌ها، توسعه یافته است. برای آگاهی بیشتر و امکان تهیه اسپری فیکساتیو می‌توانید با پاتولوژی شاپ تماس بگیرید.

روند انجام تکنیک به‌صورت زیر است

• پس از نمونه‌برداری، اسمیر سیتولوژیک را روی یک لام شیشه‌ای پخش کنید
• بلافاصله نمونه روی لام را با استفاده از محلول فیکساتور موجود در یک اسپری، تثبیت کنید.
• برای جلوگیری از از بین رفتن سلول‌ها، باید فیکساتور را سه‌بار به‌طور مساوی روی اسمیر سیتولوژیک هنوز مرطوب، از فاصله تقریباً 20 سانتی‌متری اسپری کنید.
• به دلیل یک جت بسیار شدید، الکل سیتواسپری تبخیر شده و پلی گلیکول یک لایه محافظ تشکیل می‌دهد.
• اسمیر سیتولوژیک تقریباً پس از10 دقیقه خشک شده و آماده رنگ‌آمیزی است.
• قبل از رنگ‌آمیزی با استفاده از یکی از محلول‌های هماتوکسیلین، نمونه باید به‌مدت 10 دقیقه در محلول الکل 95٪ (Histanol 95) غوطه‌ور شود تا پلی گلیکول‌ها از اسپری فیکساتیو حذف شوند.
• نمونه خشک شده را می‌توان بیشتر ذخیره یا پردازش کرد. نمونه‌های تهیه شده با استفاده از این تکنیک، برای مدت چند هفته پایدار می‌مانند.