محلول‌های زیادی با فرمولاسیون‌های مختلف (معمولاً فیکساتورهای مبتنی بر فرمالدئید) در پاتولوژی و هیستوپاتولوژی به اهداف آزمایشگاهی مورد استفاده قرار می‌گیرند. رایج‌ترین فیکساتور مورداستفاده در بافت‌شناسی فرمالدئید است که معمولاً به‌عنوان یک فرمالین بافر خنثی 10% (NBF) استفاده می‌شود که یک نسبت 3.7٪ – 4.0٪ فرمالدئید در بافر فسفات، با PH حدود هفت است.
محلول بوئن یک محلول فیکساتور مبتنی بر فرمالدئید است که در هیستولوژی و سیتولوژی برای حفظ نمونه‌های بافتی استفاده می‌شود. برای آشنایی با برخی خصوصیات این محلول فیکساتور با ما همراه باشید.
فرمولاسیون محلول بوئن
محلول بوئن ترکیبی از اسید استیک 5%، فرمالدئید 9% و اسید پیکریک 1.5% در محلول آبی است. محلول بوئن با مخلوط کردن محلول اشباع اسید پیکریک در اتانول 95 درصد (80 میلی لیتر) با فرمالین (37-40 درصد فرمالدئید) (15 میلی لیتر) و اسید استیک گلاسیال (5 میلی لیتر) تهیه می شود.
این محلول از چهار جزء تشکیل شده است:
- اسید پیکریک (25 گرم در لیتر): اسید پیکریک یک اسید قوی است که به حفظ ساختار سلولی کمک می‌کند.
- اسید استیک (10 گرم در لیتر): اسید استیک به حفظ رنگ طبیعی بافت کمک می‌کند.
- فرمالدهید (40 میلی لیتر در لیتر): فرمالدهید یک عامل ضد عفونی کننده است که از رشد باکتری‌ها و قارچ‌ها جلوگیری می‌کند.
- آب مقطر (تا 1 لیتر): آب مقطر برای رقیق کردن اجزای دیگر محلول استفاده می‌شود.
محلول بوئن برای فیکس کردن طیف گسترده ای از نمونه های بافتی از جمله بافت های نرم، بافت های سخت، بافت های سرطانی و بافت های آلوده استفاده می شود. این محلول به ویژه برای فیکس کردن بافت های نرم که به راحتی فاسد می شوند، مانند پوست، مخاط و بافت های عصبی، مناسب است.
محلول بوئن به مدت 24 تا 72 ساعت برای فیکس کردن نمونه ها استفاده می شود. سپس نمونه ها برای برش و رنگ آمیزی آماده می شوند.
محلول بوئن یک محلول فیکس کننده موثر است که به حفظ ساختار و رنگ طبیعی بافت ها کمک می کند. این محلول برای طیف گسترده ای از نمونه های بافتی مناسب است و به ویژه برای فیکس کردن بافت های نرم که به راحتی فاسد می شوند، مناسب است.
کاربرد محلول بوئن
محلول بوئن یک محلول فیکس کننده مؤثر است که به حفظ ساختار و رنگ طبیعی بافت‌ها کمک می‌کند. این محلول برای طیف گسترده‌ای از نمونه‌های بافتی مناسب است. برای فیکس کردن بافت‌های نرم که به‌راحتی فاسد می‌شوند و هنگامی که ساختارهای نرم و ظریف بافت باید حفظ شوند، تثبیت‌کننده بسیار خوبی است.
باتوجه‌به نگرانی از اینکه فیکساتورهای رایج، مانند فرمالین، ممکن است ساختار بافت‌های بیضه را مخدوش کنند، محلول Bouin به طور سنتی فیکساتور توصیه شده برای نمونه‌های بیوپسی بیضه بوده است.
محلول بوئن با بافتی که متعاقباً رنگ‌آمیزی تری کروم می‌شود، نتایج بسیار خوبی می‌دهد؛ لذا به‌عنوان ثابت‌کننده و خشک‌کننده برای بافت‌هایی که با روش‌های تری کروم رنگ‌آمیزی شده‌اند عمل می‌کند. برخی از نمونه‌هایی که استفاده از محلول بوئن به‌عنوان فیکساتور برای آنها توصیه شده است عبارت‌اند از:
- پوست
- مخاط و بافت‌های عصبی
- بیوپسی بیضه
- بیوپسی پروستات
- بیوپسی کلیه‌ها
- بافت‌های سخت
- بافت‌های سرطانی
- بافت‌های آلوده
- بیوپسی‌های دستگاه گوارش
- جنین حیوانات
- بافت غدد درون‌ریز
- لخته‌های مغز استخوان
- بیوپسی غدد لنفاوی
محدودیت استفاده بوئن
محلول بوئن گلیکوژن را به‌خوبی حفظ می‌کند، اما معمولاً گلبول‌های قرمز را لیز می‌کند؛ لذا از محلول بوئن نباید برای حفظ گلبول‌های قرمز خون یا بافت‌ها برای بررسی میکروسکوپ الکترونی استفاده شود. محلول بوئن مایکروویو شده نباید دوباره استفاده شود. پس از مصرف محلول را دور بریزید. محلول بوئن به دلیل داشتن ماهیت اسیدی، رسوبات کوچک کلسیم و رسوبات آهن را به‌آرامی از بین می‌برد.
مزایا محلول بوئن
- تثبیت در محلول بوئن منجر به رنگ‌آمیزی شدید H&E می‌شود و توسط برخی از پاتولوژیست‌ها ترجیح داده می‌شود.
- در فیکساسیون بوئن گره‌ها سفید باقی می‌مانند و چربی زردرنگ می‌شود در نتیجه می‌تواند یافتن غدد لنفاوی کوچک را تسهیل کند.
- سیال بوئن به‌سرعت نفوذ می‌کند، به طور یکنواخت ثابت می‌شود، لکه‌های هسته‌ای واضح ایجاد می‌کند و ساختارها را با ویژگی‌های نرم و ظریف حفظ می‌کند.
- از تثبیت طولانی‌مدت با محلول بوئن میتوان برای کلسیم زدایی بافت استفاده کرد.
- زمانی که لازم است گلیکوژن و سایر کربوهیدرات‌ها در بافت حفظ شوند، استفاده از محلول بوئن محلول مفید است
- محلول بوئن یک تثبیت‌کننده مرکب است. هر بخش از ترکیب دارای ویژگی خاصی است: اسید استیک باعث تورم می‌شود که با کوچک‌شدن ناشی از اسید پیکریک معکوس می‌شود. اثر تثبیت‌کننده ملایم اسید پیکریک، اثر سفت‌شدن فرمالین را کاهش می‌دهد. اسید پیکریک بافت را به رنگ زرد روشن در می‌آورد.
روش تثبیت
پس از برداشتن، نمونه را مستقیماً در محلول بوئن قرار دهید
نمونه‌های بافت را تا زمان آماده‌شدن برای پردازش یا حداکثر 72 ساعت در مایع بوئن نگه دارید.
بافت ثابت شده با محلول بوئن را به مدت 1 ساعت قبل از پردازش، به طور کامل در اتیل الکل 70٪ بشویید.
در مرحله تثبیت با فرمالین 10% ، بافر فسفات را روی پردازشگر بافت قرار دهید.
مقدار اسید پیکریک اضافی باید قبل از رنگ‌آمیزی با اتانول 70% از بافت‌ها شسته شود. رنگدانه زرد پیکریک اسید معمولاً در فرایند پارافینیزاسیون از بخش‌های بافتی حذف می‌شود. بلوک‌های بافت و اسلایس‌ها ممکن است اسید پیکریک اضافی را حفظ کنند. در صورت نیاز، روش‌های اضافی برای حذف اسید پیکریک عبارت‌اند از:
- اسلایس‌های بافت پارافینه شده را در آب جاری یا در اتیل الکل 70 درصد بشویید تا رنگدانه زرد پاک شود.
- اسلایس‌های بافت پارافین شده را در اتیل الکل 70 درصد اشباع شده با کربنات لیتیوم بشویید تا رنگدانه زرد حذف شود.
- کاربردهای پس از تثبیت سیال بوئن شامل استفاده به‌عنوان ماده خشک‌کننده برای تشدید واکنش‌های رنگی در روش‌های رنگ‌آمیزی تری کروم است.
توصیه‌های تثبیت
- لخته مغز استخوان/بیوپسی: حداقل 4 ساعت تا 24 ساعت.
- غدد لنفاوی: تا 24 ساعت. گره‌های کوچک (5 میلی متر یا کمتر) باید نصف شوند. گره‌های بزرگ‌تر را جدا کنید تا هیچ قطعه‌ای ضخیم‌تر از 2-3 میلی متر نباشد.
- بیوپسی‌های کوچک: حداقل 4 ساعت.
توصیه‌ها
- اگر نمونه در ابتدا در فرمالین 10% بافر فسفات دریافت شد، نمونه را قبل از قرار دادن در محلول بوئن به طور کامل در آب لوله کشی بشویید.
- نگهداری طولانی بافت در محلول بوئن توصیه نمی‌شود
- پس از حداکثر زمان تثبیت 72 ساعت، بافت مرطوب ثابت بوئن را به اتیل الکل 70 درصد یا فرمالین 10 درصد بافر فسفات برای اهداف نگهداری طولانی مدت منتقل کنید.
- محلول بوئن به مدت 24 تا 72 ساعت برای فیکس کردن نمونه‌ها استفاده می شود. سپس نمونه‌ها برای برش و رنگ آمیزی آماده می شوند. بافت را به دلیل اسید پیکریک زرد روشن می کند.
توصیه‌های ایمنی هنگام کار با محلول بوئن
محلول بوئن به دلیل وجود فرمالدئید در دسته سرطان‌زاهای دسته 1A طبقه‌بندی می‌شود. در استانداردهای معتبر، عوارض زیر برای محلول بوئن ثبت شده است:
- H314 باعث سوختگی شدید پوست و آسیب چشم می‌شود.
- H317 ممکن است باعث واکنش پوستی آلرژیک شود.
- H341 مشکوک به ایجاد نقص ژنتیکی.
- H350 ممکن است باعث سرطان شود.
محلول بوئن
مهم‌ترین علائم و عوارض مواجهه با محلول بوئن، چه حاد و چه تأخیری عبارت‌اند از: خوردگی شدید، سوراخ‌شدن معده، استفراغ، خطر آسیب جدی به چشم، خطر نابینایی، واکنش‌های آلرژیک، تحریک، سرفه، تنگی نفس، سردرد، گیجی، سرگیجه
- از تماس مستقیم محلول با پوست اجتناب کنید. خوردگی پوست آسیب جبران‌ناپذیری به پوست وارد می‌کند. یعنی نکروز قابل‌مشاهده از طریق اپیدرم و داخل درم. پس از قرارگرفتن در معرض کوتاه‌مدت میتوان اثرات فوری را انتظار داشت.
- تماس احتمالی با مواد غذایی را کنترل کنید
- برای مقاصد خصوصی (خانگی) استفاده نکنید.
- اسید پیکریک در صورت خشک‌شدن به‌شدت انفجاری است. اگر محلول خشک شود، اسید پیکریک می‌تواند منفجر شود.
شرح اقدامات کمک‌های اولیه
در صورت لزوم از تجهیزات حفاظت فردی استفاده کنید. به‌منظور محافظت از خود، بلافاصله تمام لباس‌های آلوده را از تن خارج کنید.
تماس استنشاقی
از تنفس بخارات یا اسپری خودداری کنید. اگر استنشاق صورت گرفت باید هوای تازه فراهم کنید.
تماس پوستی
به دنبال تماس با پوست بلافاصله موضع را با آب فراوان بشویید. در صورت باقی‌ماندن محلول روی پوست درمان فوری پزشکی مورد نیاز است؛ زیرا جراحات خورنده‌ای که ایجاد می‌شوند به‌سختی قابل‌درمان هستند.
تماس چشمی
در صورت تماس با چشم بلافاصله با آب جاری به مدت 10 تا 15 دقیقه با باز نگه داشتن پلک‌ها شستشو داده و با چشم پزشک مشورت کنید. از چشم آسیب ندیده محافظت کنید.
بلعیده‌شدن محلول
در صورت بلعیده‌شدن خطر سوراخ‌شدن مری و معده به دلیل اثرات خورندگی قوی وجود دارد. فوراً دهان را با حجم زیاد آب بشویید و فقط درصورتی‌که فرد هوشیار، آگاه باشد به او مقدار زیادی آب بنوشانید.
مشاوره پزشکی
در صورت بروز تصادف، در تمام مواردی که شک وجود دارد، یا زمانی که علائم ادامه یافت فوراً به دنبال مشاوره پزشکی باشید (در صورت امکان برگه اطلاعات ایمنی یا دستورالعمل‌های استفاده را به پزشک ارائه نمایید).
اقدامات احتیاطی برای جابه‌جایی ایمن
ظرف حاوی محلول بوئن را بااحتیاط حمل و باز کنید.
از تأمین تهویه کافی مطمئن شوید
مستقیماً در معرض محلول بوئن قرار نگیرید.
مناطق آلوده شده با محلول بوئن را کاملاً پاک کنید.
برای جلوگیری از آتش‌سوزی و همچنین تولید آئروسل و گردوغبار اقدامات احتیاطی را انجام دهید.
برای تهیه انواع تجهیزات پاتولوژی، میتوانید از طریق وبسایت ثبت سفارش کنید؛ در صورتی نیاز به مشاوره دارید با شماره های زیر تماس بگیرید: 09121916608 یا 09129153154 تماس بگیرید.
نقد و بررسی‌ها
هیچ دیدگاهی برای این محصول نوشته نشده است.